在生物制劑研發(fā)及生產(chǎn)過程中常會用到緩沖液,Tris-HCl和HEPES就是兩種常見的緩沖液,其作用是在有限的范圍內(nèi)調(diào)整溶液的pH值,使溶液的酸堿度符合制劑成分適宜的范圍。你知道它們在應(yīng)用的過程中都有哪些優(yōu)缺點(diǎn)嗎?
一、Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液優(yōu)缺點(diǎn)對比
1、Tris-HCl緩沖液
Tris緩沖液是在生化研究及制劑生產(chǎn)中使用較廣泛的一種緩沖劑,其本身為弱堿,常用有效pH在“中性"范圍,如Tris-HCl緩沖液:pH=7.5~8.5;Tris-磷酸鹽緩沖液:pH=5.0~9.0。
①Tris-HCl緩沖液優(yōu)點(diǎn)
堿性較強(qiáng),可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的范圍pH緩沖液;對生物化學(xué)過程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。
②Tris-HCl緩沖液缺點(diǎn)
pH受濃度影響較大,稀釋10倍,pH變化大于0.1。溫度效應(yīng)大,如4℃時pH=8.4,37℃時pH=7.4。
2、HEPES緩沖液
HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,常用在體外診斷、DNA/RNA提取、脂質(zhì)體藥物等方面。
①HEPES緩沖液優(yōu)點(diǎn):
在開放式培養(yǎng)或細(xì)胞觀察時能維持較恒定的pH值,并對細(xì)胞無毒性作用。
②HEPES緩沖液缺點(diǎn):
在高濃度時對一些細(xì)胞可能有毒,與其他緩沖劑相比成本略高。
Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液都是生物制劑中常用的緩沖液,在不同的實(shí)驗(yàn)中,不同的緩沖液發(fā)揮著不同的效果,在選擇緩沖液時,需要結(jié)合制劑本身的特性和處方優(yōu)化的需求綜合考量。
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